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    色譜峰寬的構成

    更新時間:2016-09-19      點擊次數:2026

           色譜分析時經常會有先出來的峰就窄,出來的就寬的情況。色譜峰寬是由很多因素構成的,每個因素影響程度不同,造成的結果也不同,誰的影響力大,就主要顯示誰的作用結果。那么色譜峰寬,到底由哪幾部分構成?

        色譜峰寬由兩部分構成: 一、對稱峰寬。二、拖尾峰寬。所謂對稱峰寬,就是指這種峰寬不會造成峰型不對稱,不會出現拖尾前伸。而拖尾峰寬,就是指這個峰寬構成,會導致峰形狀變的不對稱。我們首先要研究的是對稱峰寬,這個導致了峰寬的主要構成。

    一、對稱峰寬。

    對稱峰寬主要包括兩部分:1、塔板理論正常展寬。2、正常進樣峰展寬。

    1、塔板理論正常展寬

        根據塔板理論,進樣時處于0號塔板的組分,離開色譜柱時已經占據了很多塊塔板,導致峰寬加大,并形成正態分布的峰型。

    2、正常的進樣展寬

        根據塔板理論,樣品進樣時都停留在0號塔板上,但這是不可能的。因為一個塔板的體積是如此的小,以至于根本放不下襯管里面哪怕是經過分流之后的樣品。比如你的襯管有0.5ml,分流比50倍,那么進入色譜柱的體積大約有10立方毫米。但你的毛細管柱內徑就算是0.53mm的,可是這是直徑啊,算下來,這些樣品都進去,也要占據大約50mm長的柱子。也就是說,0號塔板放不下,要放到。。。。算你的柱子是50m,那么就是柱效的千分之一了,毛細管柱,算你10萬塊板,那么也是100塊塔板了。

       那么說,進樣寬度就是100塊塔板了?錯。進樣寬度沒有這么大,只有這個數值除以分配比k之后的塔板數。為什么要除以分配比?因為色譜柱固定相可以溶解很多樣品中待測組分,所以待測組分在這100塊板上濃度不同,只有前面1/k的塔板上濃度比較高。

    1、為什么毛細管柱,所有色譜峰基本一般寬?

    答:因為毛細管柱內徑小,樣品進樣正常展寬很大,而且因為柱效率(理論塔板數)高,所以塔板理論展寬與柱效率的平方根成反比,這個很小,所以峰寬主要由進樣展寬構成,而組分的進樣展寬在色譜柱內前進時保持不變,所以從柱尾流出來的時候,寬度主要由進樣展寬決定,而所有組分的進樣展寬基本一致,因此都是一樣寬。

     2、為什么填充柱色譜,先出峰很窄,后出峰很寬?

    答:因為填充柱的內徑大,樣品進樣正常展寬很小,所以峰寬主要是踏板理論展寬構成,而根據踏板理論,峰寬與保留時間成正比,所以后出的峰比較寬。

    3、為什么會有溶劑聚焦現象?

    答:因為溶劑聚焦是柱箱初始溫度比溶劑沸點低,導致溶劑在柱頭冷凝成液體,相當于增加了一層溶解度很大的固定液,導致分配比k增加很多倍,這樣進樣寬度就減小很多倍,所以色譜峰就窄了。

    4、為什么有的難分離組分用薄膜柱子或者固定液涂澤量少的柱子來分析分離度大,而更多的組分用厚膜或者固定液涂澤量大的分離度高?

    答:分離度等于保留時間之差除以峰寬之和的一半。根據速率理論,薄膜的柱子傳質阻力小,所以柱效率高,分離度高。但根據進樣寬度,厚膜柱子分配比k大,所以進樣展寬小,色譜峰寬小,因此分離度高。

         一般來說,高含量組分用厚膜柱子好,可以減少進樣寬度,增加分離度;低含量組分用厚膜柱子好,因為厚膜柱子允許更大的進樣量,檢出限高。???那么薄膜柱子就沒存在的必要了?錯。薄膜柱子柱流失小的多,而且對于含量不大不小的樣品,也有更好的分離度。

     

     

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